EP 0628076 A1 19941214 - PRODUCTION OF MONOCLONAL RECOMBINANT ANTIBODIES WITHOUT THE USE OF HYBRIDOMAS BY -i(IN VITRO) SPLEEN FRAGMENT CULTURE COMBINED WITH ISOTHERMAL SELF-SUSTAINED SEQUENCE REPLICATION OF RNA.
Title (en)
PRODUCTION OF MONOCLONAL RECOMBINANT ANTIBODIES WITHOUT THE USE OF HYBRIDOMAS BY -i(IN VITRO) SPLEEN FRAGMENT CULTURE COMBINED WITH ISOTHERMAL SELF-SUSTAINED SEQUENCE REPLICATION OF RNA.
Title (de)
Verwendung von rekombinante Monoklonale Antikörpern durch in Vitro Kulten von Milz-Bruchstücke in Verbindung mit der '3sR'RNA Amplifikations techniek.
Title (fr)
PRODUCTION D'ANTICORPS MONOCLONAUX RECOMBINES SANS UTILISATION D'HYBRIDOMES ET PAR CULTURE -i(IN VITRO) DE FRAGMENT DE RATE COMBINEE AVEC LA REPLICATION AUTONOME ISOTHERMIQUE DE SEQUENCES D'ARN.
Publication
Application
Priority
- US 9311295 W 19931119
- US 97883592 A 19921119
Abstract (en)
[origin: WO9411507A2] The invention is directed to a method for producing a recombinant protein having a preselected binding affinity and specificity for a given antigen. Generally, the method combines spleen fragment culture for the in vitro somatic mutation of B cells in response to antigen, followed by preferential amplification of RNA encoding heavy and light chains of desired antibodies produced by those B cells. The amplified RNA is then converted to DNA and incorporated into expression vectors; transfected host cells then express the antibody chains or a single chain antibody having preselected characteristics. Also disclosed are generic degenerate primer pools for the efficient amplification of RNA encoding mouse IgG.
Abstract (fr)
L'invention se rapporte à un procédé de production d'une protéine recombinée présentant une spécificité et une affinité de liaison présélectionnée par rapport à un antigène donné. Le procédé consiste à combiner généralement la culture d'un fragment de la rate, destinée à la mutation somatique in vitro de lymphocytes B en réponse à l'antigène, et l'amplification préférentielle d'ARN codant des chaînes lourdes et légères d'anticorps requis produits par ces lymphocytes. L'ARN amplifié est alors converti en ADN et incorporé à des vecteurs d'expression; des cellules hôtes transfectées expriment alors les chaînes d'anticorps ou un anticorps à chaîne unique présentant les caractéristiques présélectionnées. L'invention se rapporte également à des groupes d'amorces dégénérées génériques destinées à l'amplification d'ARN codant l'IgG de souris.
IPC 1-7
C12N 15/12; C12N 15/13; C12P 21/08; C07K 15/28; C12Q 1/68; G01N 33/68
IPC 8 full level
C07K 16/00 (2006.01); C12N 15/12 (2006.01); C12P 21/08 (2006.01); C12Q 1/68 (2006.01)
CPC (source: EP)
C07K 16/00 (2013.01); C12Q 1/6865 (2013.01)
Citation (search report)
See references of WO 9411507A2
Designated contracting state (EPC)
BE DE ES FR GB IT NL SE
DOCDB simple family (publication)
WO 9411507 A2 19940526; WO 9411507 A3 19940707; AU 5673794 A 19940608; EP 0628076 A1 19941214
DOCDB simple family (application)
US 9311295 W 19931119; AU 5673794 A 19931119; EP 94902330 A 19931119