[0001] La présente invention concerne un nouveau procédé de préparation de l'acide N⁶-benzyloxycarbonyl
diamino-2,6 pimélamique de formule :

sous les formes L,L ou D,D ou racémique.
[0002] Le produit de formule (I) est un intermédiaire de synthèse des peptides qui font
l'objet des brevets français FR 79 16844 (2 460 289), FR 79 16845 (2 460 290), FR
80 11231 (2 482 958) et FR 80 11233 (2 482 960) et qui présentent des propriétés immunostimulantes
remarquables.
[0003] Selon le brevet français FR 79 16844 (2 460 289), le produit de formule (I) peut
être obtenu à partir de l'acide diamino-2,6 pimélique. A cet effet, on prépare selon
les méthodes connues l'ester dibenzylique de l'acide dibenzyloxycarbonylamino-2,6
pimélique qui est mono-saponifié selon la méthode décrite par A. ARENDT et coll.,
Roczniki Chemii Ann. Soc. Chim. Polonorum,
48, 1305 (1974) [Chem. Abstr.,
82, 31497 g (1975)] puis transformé, par action du méthanol ammoniacal, en monoacide
de formule :

dans laquelle Z représente un radical benzyloxycarbonyle qui, après hydrogénolyse
en présence de palladium sur noir, fournit l'acide diamino-2,6 pimélamique.
[0004] Par action d'un sel de cuivre, tel que le bromure cuivrique ou le carbonate basique
de cuivre, sur l'acide diamino-2,6 pimélamique, il se forme un complexe qui peut être
représenté par la formule :

dont les fonctions amines libres sont protégées par action d'un halogénoformiate
de benzyle. Le complexe ainsi formé est déplacé par action de l'hydrogène sulfuré
pour donner le produit de formule (I).
[0005] A partir de l'acide dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimélique, l'acide N⁶-benzyloxycarbonyl
diamino-2,6 pimélamique est obtenu avec un rendement global voisin de 9 %.
[0006] Il a maintenant été trouvé, et c'est ce qui fait l'objet de la présente invention,
que l'acide N⁶-benzyloxycarbonyl diamino-2,6 pimélamique de formule (I) peut être
obtenu à partir de l'acide dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimélique avec un rendement
nettement amélioré par un procédé comportant un plus petit nombre d'étapes.
[0007] Selon la présente invention, l'acide N⁶-benzyloxycarbonyl diamino-2,6 pimélamique
peut être obtenu par action d'un agent d'amidification sur l'acide O¹-p.nitrobenzyl
N²-benzyloxycarbonyl diamino-2,6 pimélique. Généralement, l'amidification est réalisée
à une température voisine de 20°C au moyen d'une solution d'ammoniaque en opérant
en présence d'un solvant non miscible à l'eau choisi parmi les hydrocarbures aromatiques
(toluène), les hydrocarbures aliphatiques halogénés (chlorure de méthylène), les éthers
(éther éthylique) ou les esters (acétate d'éthyle).
[0008] L'acide O¹-p.nitrobenzyl N²-benzyloxycarbonyl diamino-2,6 pimélique peut être obtenu
par action d'un agent capable de transformer un acide en l'halogénure d'acyle correspondant,
tel que le pentachlorure de phosphore, le tribromure de phosphore ou le chlorure
de thionyle, sur l'acide O¹-p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimélique.
[0009] De préférence, on utilise le pentachlorure de phosphore en opérant dans un solvant
organique tel que le chlorure de méthylène à une température comprise entre 0 et
30°C.
[0010] L'acide O¹-p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimélique peut être préparé
à partir de l'acide diamino-2,6 pimélique selon le procédé décrit par A. ARENDT et
coll., Roczniki Chemii Ann. Soc. Chim. Polonorum,
48, 1501 (1974) [Chem. Abstr.,
82, 171409 n(1975)].
[0011] Le procédé selon la présente invention permet, à partir d'un acide O¹-p.nitrobenzyl
dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimélique sous forme L,L ou D,D ou racémique, d'obtenir
l'acide N⁶-benzyloxycarbonyl diamino-2,6 pimélamique respectivement sous forme L,L
ou D,D ou racémique.
[0012] A partir de l'acide dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimélique, l'acide N⁶-benzyloxycarbonyl
diamino-2,6 pimélamique est obtenu, selon le procédé de la présente invention, avec
un rendement global généralement supérieur à 20 %.
[0013] Les exemples suivants, donnés à titre non limitatif, montrent comment l'invention
peut être mise en pratique.
EXEMPLE 1
[0014] A un mélange de 1,24 l d'ammoniaque à 20 % et de 175 cm³ d'acétate d'éthyle, on ajoute
57,9 g d'acide O¹-p.nitrobenzyl N²-benzyloxycarbonyl L,L diamino-2,6 pimélique. On
agite pendant 24 heures à 20°C environ. La phase aqueuse est séparée par décantation
et est lavée 3 fois avec 600 cm³ au total d'acétate d'éthyle, puis est refroidie vers
10°C et enfin est neutralisée à pH=6 par addition de 250 cm³ d'acide acétique anhydre.
On obtient une bouillie que l'on agite pendant 1/2 heure vers 5°C. On filtre, lave
l'insoluble 2 fois par 400 cm³ au total d'acide acétique et 2 fois par 400 cm³ au
total d'acétate d'éthyle. Après séchage sous pression réduite (20 mm de mercure ;
2,7 kPa), on obtient 23,5 g d'acide N⁶-benzyloxycarbonyl L,L diamino-2,6 pimélamique
dont les caractéristiques sont les suivantes :
- Rf = 0,46 [silicagel ; n.butanol-pyridine-acide acétique-eau (50-20-6-24 en volumes)],
- Rf = 0,44 [silicagel ; acétate d'éthyle-acide acétique-eau (40-12-10 en volumes)],
- après hydrolyse méthylante (méthanol chlorhydrique 6N à ébullition) suivie d'une
acylation avec l'anhydride trifluoracétique, le dosage par chromatographie en phase
gazeuse sur colonne CHIRASIL-VAL montre que le produit obtenu contient 99,8 % de forme
L,L et 0,2 % de forme méso.
-

= +18,2° (acide acétique, c = 0,3)
[0015] L'acide O¹-p.nitrobenzyl N²-benzyloxycarbonyl L,L diamino-2,6 pimélique peut être
préparé de la façon suivante :
[0016] A une solution refroidie à 5°C de 268 g d'acide L,L O¹-p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylamino-2,6
pimélique dans 4 l de chlorure de méthylène, on ajoute en 15 minutes, par petites
portions, 112,8 g de pentachlorure de phosphore. On agite le milieu réactionnel pendant
50 minutes à 5°C, puis pendant 15 minutes à 20°C. Ensuite, en 50 minutes, on élimine
du milieu réactionnel 2 l de chlorure de méthylène par distillation à pression ordinaire.
Au concentrat refroidi à 5°C, on ajoute 6,66 l d'éther de pétrole. On abandonne à
5°C pendant 24 heures puis on élimine la phase éthérée. L'huile résiduelle est triturée
3 fois avec 1,5 l au total d'éther de pétrole puis est dissoute dans 1 l de chlorure
de méthylène. Après concentration à sec sous pression réduite (20 mm de mercure ;
2,7 kPa) à 50°C, la meringue obtenue est dissoute dans 1,74 l d'acide acétique anhydre.
A cette solution, on ajoute 0,87 l d'eau. On abandonne à 20°C pendant 24 heures, puis
on verse la solution dans un mélange de 7,2 l d'eau et de 2 l d'éther. On amène la
phase aqueuse à pH=5 par addition lente de 400 g de carbonate de sodium. Le précipité
formé est séparé par filtration, lavé successivement 2 fois par 1 l au total d'eau
distillée et 3 fois par 1,5 l au total d'éther. Après séchage à l'air libre, puis
sous pression réduite (20 mm de mercure ; 2,7 kPa) à 50°C, on obtient 169,3 g d'acide
O¹-p.nitrobenzyl N²-benzyloxycarbonyl L,L diamino-2,6 pimélique dont les caractéristiques
sont les suivantes :
- Rf = 0,61 [silicagel ; n.butanol-pyridine-acide acétique-eau (50-20-6-24 en volumes)].
[0017] L'acide O¹-p.nitrobenzyl N²-benzyloxycarbonyl L,L diamino-2,6 pimélique peut être
préparé selon la méthode de A. ARENDT et coll., Roczniki Chemii Ann. Soc. Chim. Polonorum,
48, 1501 (1974).
EXEMPLE 2
[0018] A un mélange de 226 cm³ d'ammoniaque à 20 % et de 35 cm³ d'acétate d'éthyle, on ajoute
10,4 g d'acide O¹-p.nitrobenzyl M²-benzyloxycarbonyl D,D diamino-2,6 pimélique. On
agite pendant 3 heures à une température voisine de 20°C. La phase aqueuse est séparée
par décantation, lavée 3 fois avec 120 cm³ au total d'acétate d'éthyle, concentrée
partiellement jusqu'à pH=7 sous pression réduite (20 mm de mercure ; 2,7 kPa) à 50°C.
On obtient ainsi une bouillie qui est refroidie à 4°C pendant 1 heure, filtrée et
lavée 3 fois par 30 cm³ au total d'eau. Après séchage sous pression réduite (20 mm
de mercure ; 2,7 kPa) à 20°C, on obtient 5,36 g d'acide N⁶-benzyloxycarbonyl D,D diamino-2,6
pimélamique dont les caractéristiques sont les suivantes :
- Rf = 0,46 [silicagel ; n.butanol-pyridine-acide acétique-eau (50-20-6-24 en volumes)].
[0019] L'acide O¹-p.nitrobenzyl N²-benzyloxycarbonyl D,D diamino-2,6 pimélique peut être
préparé de la même manière que l'isomère L,L.
[0020] Ainsi à partir de 26,57 g d'acide D,D O¹-p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylamino-02,6
pimélique, de 11,18 g de pentachlorure de phosphore et de 460 cm³ de chlorure de méthylène,
on obtient 10,44 g d'acide O¹-p.nitrobenzyl N²-benzyloxycarbonyl D,D diamino-2,6
pimélique dont les caractéristiques sont les suivantes :
- Rf = 0,61 [silicagel ; n.butanol-pyridine-acide acétique-eau (50-20-6-24 en volumes)].
[0021] L'acide D,D O¹-p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimélique peut être préparé
selon la méthode de A. ARENDT et coll., Roczniki Chemii Ann. Soc. Chim. Polonorum,
48, 1501 (1974).
EXEMPLE 3
[0022] En opérant de la même manière que dans l'exemple 2, à partir de 52,38 g d'acide O¹-p.nitrobenzyl
N²-benzyloxycarbonyl DD,LL diamino-2,6 pimélique, de 1900 cm³ d'ammoniaque à 20 %
et de 270 cm³ d'acétate déthyle, on obtient 26,58 g d'acide N⁶-benzyloxycarbonyl
DD,LL diamino-2,6 pimélamique dont les caractéristiques soint les suivantes :
- Rf = 0,46 [silicagel ; n.butanol-pyridine-acide acétique-eau (50-20-6-24 en volumes)].
[0023] L'acide O¹-p.nitrobenzyl N²-benzyloxycarbonyl DD,LL diamino-2,6 pimélique peut être
préparé de la même manière que l'isomère L,L.
[0024] Ainsi à partir de 114 g d'acide DD,LL O¹-p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylamino-2,6
pimélique, de 48 g de pentachlorure de phosphore et de 1,5 l de chlorure de méthylène,
on obtient 52,9 g d'acide O¹-p.nitrobenzyl N²-benzyloxycarbonyl DD,LL diamino-2,6
pimélique dont les caractéristiques sont les suivantes :
- Rf = 0,61 [silicagel ; n.butanol-pyridine-acide acétique-eau (50-20-6-24 en volumes)].
[0025] L'acide DD,LL O¹-p.nitrobenzyl dibenzyloxycarbonylamino-2,6 pimélique peut être
préparé selon la méthode de A. ARENDT et coll., Roczniki Chemii Ann. Soc. Chim. Polonorum,
48, 1501 (1974).