Composition cosmétique contenant des composés obtenus par culture de cellules, notamment de fibroblastes ou de kératinocytes

Description

[0001] La présente invention concerne une composition contenant des composés obtenus par culture de cellules.

[0002] On a déjà décrit, dans le document, FR-A-2 585 567 une composition constituée par une culture de cellules dans un milieu de croissance approprié, convenant aux traitements cosmétiques ; les cellules sont, de préférence, des fibroblastes et des kératinocytes ; elles peuvent être humaines, animales despécifiées, ou mêmes végétales, vivantes ou mortes.

[0003] On connaît aussi, par le document EP-A-0̸ 272 920̸, une composition cosmétique contenant un milieu de culture obtenu après séparation des cellules, qui y ont été cultivées.

[0004] Ces compositions cosmétiques contenant des cellules cultivées avec leur milieu de croissance, ou contenant uniquement le milieu de croissance de cellules permettent de transmettre à la peau des vecteurs cellulaires dans un environnement de croissance et, par conséquent, de stimuler les phénomènes de croissance de la peau mais n'ont aucun rôle de protection de la peau.

[0005] La présente invention concerne une composition cosmétique qui permet de protéger la peau ou les cheveux contre les agressions de toute nature, telles que les radiations ultra-violettes, les écarts de température, la sécheresse de l'air et la pollution.

[0006] Selon la présente invention, on introduit, dans une composition cosmétique destinée à cette protection, des substances protectrices synthétisées par des cellules cultivées in vitro, qui ont été agressées pendant ladite culture in vitro.

[0007] En effet, il est connu que, dans toutes les situations d'agression que rencontre, par exemple, la peau, celle-ci doit préserver son équilibre biologique. Elle synthétise alors des substances servant à son adaptation, de manière à maintenir son rôle protecteur. Toutefois, ces substances ne suffisent pas à elles seules à protéger la peau et l'agression a, dans tous les cas, des effets négatifs, qui s'expliquent, notamment, par le temps de latence qui s'écoule entre l'agression et la synthèse des substances protectrices par la peau. Les phénomènes sont de même nature pour les cheveux. L'application d'une composition cosmétique selon l'invention permet à la peau et/ou aux cheveux d'être en contact, au moment de l'agression in vivo, avec les substances protectrices préparées in vitro par culture de cellules. On a constaté que les substances synthétisées in vitro pouvaient être utilisées in vivo par la peau ou les cheveux par application externe. En outre, on a constaté que les substances synthétisées in vitro avaient une durée de vie suffisante pour pouvoir être utilisées dans des compositions cosmétiques et que, de plus, elles sont compatibles avec les différents composés généralement utilisés dans les compositions cosmétiques.

[0008] La présente invention a donc pour objet une composition cosmétique contenant, dans un support cosmétiquement acceptable, au moins un composé obtenu par culture de cellules animales, notamment de fibroblastes ou de kératinocytes, caractérisée par le fait que ledit composé est une substance protectrice de la peau ou des cheveux, synthétisée par lesdites cellules en réponse à au moins une agression, lorsqu'elles sont cultivées in vitro.

[0009] Les substances protectrices sont, de préférence, utilisées sans séparation ou purification préalable, sous forme d'un principe actif constitué par le milieu de culture et/ou les cellules cultivées et/ou la solution obtenue après éclatement des cellules cultivées. Le milieu de culture et/ou la solution obtenue après éclatement des cellules sont avantageusement concentrées pour augmenter leur teneur en substances protectrices.

[0010] La composition peut, avantageusement, contenir en mélange des principes actifs obtenus en réponse à plusieurs agressions. On peut, par exemple, introduire dans la composition un mélange des principes actifs obtenus par culture de cellules avec agression par action de rayons ultra-violets et par culture de cellules agressées par des chocs thermiques.

[0011] L'agression est, de préférence, constituée par l'action d'un rayonnement ultra-violet, de variations de température, d'un champ électromagnétique, d'un agent chimique, et/ou d'une carence en élément normalement présent dans le milieu de culture. Selon l'invention, on peut soumettre les cellules in vitro à plusieurs agressions successives. Il est également possible de soumettre les cellules à des agressions simultanées (par exemple agression chimique et agression thermique). Dans le cas d'agressions multiples, le principe actif obtenu contient directement, sans qu'il soit nécessaire de faire des mélanges, des substances obtenues en réponse aux différentes agressions.

[0012] Selon l'agression subie par les cellules, différentes substances protectrices ou mélanges de substances protectrices sont synthétisées. Ces substances ou mélanges de substance n'ont, le plus souvent, pas été isolés et ne sont pas toujours bien connus. Les substances protectrices sont, soit excrétées dans le milieu de culture, soit localisées dans la cellule. Ces substances protectrices peuvent être des molécules riches en énergie, des substances immunorégulatrices, des substances aptes à stimuler la croissance des cellules et/ou des molécules de réparation.

[0013] On sait que des cultures de cellules épidermiques soumises à l'action de radiations ultra-violettes synthétisent, entre autres, un facteur "hormone-like" : l'E.T.A.F. (Epidermal cell-derived Thymocyte Activating Factor), qui peut être assimilé à l'interleukine-1 (voir les articles : "The Journal of Investigative Dermatology", volume 81, n° 6, 1983 ; "British Journal of Dermatology", 1985, 113, supplément 28 ; et "Arch. Dermatol. Res.", 1988, 280̸, 71-76). D'autres cytokines sont également produites par les cellules épidermiques, en particulier l'interleukine-3 et l'ENKAF (Epidermal cell-derived Natural Killer cell Augmenting Factor).

[0014] L'agression thermique conduit, de façon connue, à la synthèse de protéines particulières dites "de choc thermique". En effet, lorsque les cellules en culture sont soumises à une élévation brutale de la température, de nombreuses protéines cellulaires sont dénaturées. Les protéines "de choc thermique" interviennent alors pour limiter cette dénaturation, dégradent éventuellement les protéines anormales et protègent les structures cellulaires, telles que, par exemple, le cytosquelette.

[0015] L'agression électromagnétique donne des substances protectrices, qui augmentent la perméabilité des membranes et stimulent certaines voies métaboliques telles que la synthèse de l'adénosine triphosphate.

[0016] Selon l'agression subie par les cellules, différentes autres substances peuvent être synthétisées.

[0017] Selon la présente invention, on cultive, de préférence, des cellules extraites de la peau humaine, de la gaine d'un cheveu humain ou d'un cil et, notamment, des kératinocytes ou des fibroblastes. Les cellules sont, avantageusement, prélevées chez la personne destinée à utiliser la composition cosmétique. On peut ainsi obtenir des compositions personalisées, dont l'application présente une très grande sécurité et une grande innocuité et qui diminue les risques d'allergies. Selon l'invention, il peut être avantageux de faire des prélèvements chez l'individu jeune, puis de congeler les cellules après leur multiplication et de les conserver durant plusieurs années. Elles seront remises en culture après décongélation dans les mêmes conditions que les cellules fraîchement prélevées.

[0018] Selon la présente invention, les cellules sont mises en culture, puis subissent l'agression (ou les agressions) choisie(s), de préférence lorsqu'elles ont atteint la confluence. La culture peut s'effectuer en présence de précurseurs des substances qui seront synthétisées suite à l'agression. On peut citer comme précurseurs, à titre d'exemple, les acides aminés, les bases nucléiques et le pyruvate de sodium.

[0019] On décrit ci-après, à titre d'exemple, un protocole de culture de kératinocytes humains et de fibroblastes humains.

a) Protocole de culture de kératinocytes humains.

[0020] Dans le cas où l'on cultive des kératinocytes provenant d'épiderme de peau, la peau est, par exemple, obtenue par une technique classique de chirurgie esthétique. Après avoir été dégraissé, l'épiderme est isolé par trypsinisation et les cellules sont mises en culture dans un milieu contenant, par exemple, 10 % de sérum de veau foetal, des antibiotiques, du pyruvate et de la glutamine.

[0021] Dans le cas où on cultive des kératinocytes provenant de la gaine du cheveu, on récolte les follicules pileux au stade anagène par arrachage ou à la suite d'intervention de chirurgie esthétique. Ils sont cultivés soit sur une membrane de cristallin de boeuf, soit sur collagène dans un milieu Eagle's modifié ou un milieu de Mac Coy, supplémenté en sérum de veau foetal (10̸ %), glutamine, antibiotiques, fongicides, insuline, toxine cholérique et EGF (facteur de croissance épidermique).

[0022] Les kératinocytes peuvent également provenir de la gaine du cil.

b) Protocole de culture de fibroblastes humains.

[0023] Les fibroblastes sont isolés à partir de la peau glabre de scalp. Après avoir éliminé l'hypoderme et l'épiderme, le derme est incubé dans une solution d'antibiotiques puis lavé au "Phosphate Buffer Saline" (PBS) et traité à la collagénase à 37°C. Après avoir filtré puis centrifugé la suspension cellulaire, le culot est mis en culture dans un milieu complet de culture à raison de 2.10⁴ cellules/cm².

[0024] Le milieu de culture est, de préférence, constitué de milieu Eagle's modifié Dulbecco supplémenté avec du sérum de veau foetal (10 %), de la pénicilline, de la streptomycine, du fongizone et de la glutamine.

[0025] Il est possible de cultiver simultanément des fibroblastes et des kératinocytes.

[0026] Selon les protocoles décrits ci-dessus, les cellules sont ensuite laissées à incuber dans une étuve réguleé en température à 37°C, en atmosphère à 5 % de CO₂ et à 95 % d'humidité relative.

[0027] Différents protocoles d'application de différentes agressions sont données ci-dessous à titre d'exemples :

1) Agression aux ultra-violets.

[0028] A confluence, le milieu de culture est éliminé, le tapis cellulaire est lavé par une solution saline tamponnée, puis les cellules sont soumises aux rayons ultra-violets.

[0029] Les doses des rayons ultra-violets généralement appliquées varient entre 0̸,2 mJ/cm² et 75 kJ/cm², et en particulier elles sont les suivantes, pour les kératinocytes :
   U.V.B. : 1 à 10̸0̸ mJ/cm²
pour les fibroblastes :
   U.V.A. : 2 à 75 kJ/cm²
   U.V.B. : 5 à 30̸ mJ/cm²
   U.V.C. : 0̸,2 à 0̸,5 mJ/cm²

[0030] Après irradiation, un milieu de culture contenant, ou non, du sérum de veau foetal, des facteurs de croissance et/ou des antibiotiques, est ajouté aux cellules et laissé en contact avec celles-ci pendant un temps qui peut varier de 12 à 48 heures, période pendant laquelle les cellules répondent à l'agression par la synthèse de nouvelles molécules.

2) Agression par la température.

[0031] La température est une agression que l'on peut facilement faire subir à des cellules en culture. Le procédé suivant a été décrit par Nancy C. COLLIER et Milton J. SCHLESINGER dans "The Journal of Cell Biology", vol. 10̸3, Octobre 86.

[0032] A confluence, le milieu de départ, qui se trouve à 37°C, est remplacé par un autre milieu contenant de l'HEPES (acide N′-2-hydroxyéthylpipérazine-N-éthane sulfonique). Les fibroblastes sont placés dans un bain-marie thermostaté à 45°C sous agitation pendant des temps variant de 30̸ min. à 3 heures. Le milieu est ensuite remplacé par du milieu Eagle's modifié, contenant ou non du sérum de veau foetal, puis laissé au contact des cellules pendant 12 à 48 heures.

[0033] Les cellules peuvent subir plusieurs chocs thermiques successifs.

3) Agression électromagnétique.

[0034] On soumet le milieu de culture à un champ magnétique homogène inférieur à 20 Gauss, avec un pic d'une durée de 5 millisecondes et une fréquence inférieure à 10̸0̸ Hertz. Ledit champ magnétique est obtenu par l'utilisation d'une paire de bobines d'Helmotz entourant les cultures cellulaires à confluence. Le milieu de culture est changé avant passage dans le champ électromagnétique. La durée d'application du champ peut aller de 1 à 4 jours. Un procédé de ce type est décrit par BERG dans la revue "Studia Biophysica", volume 119, 1987, numéros 1-3.

4) Agression chimique.

[0035] L'agression chimique peut être obtenue à l'aide de détergents, de métaux lourds ou de sels.

5) Agression par carence.

[0036] Elle est obtenue en éliminant du milieu de culture des éléments normalement présents tels que des acides aminés, des vitamines, des sucres, des bases nucléiques, des facteurs de croissance, des lipides du sérum de veau foetal et le sérum lui-même.

[0037] Lorsque les cultures ont subi l'agression ou les agressions désirées, les substances protectrices, qui ont été produites en réponse à ladite (auxdites) agression(s), sont récupérées ; elles sont contenues dans les cellules elles-mêmes (comme c'est le cas par exemple des protéines de choc thermique) et/ou dans le milieu de culture (comme c'est le cas par exemple des cytokines et des facteurs de croissance).

[0038] Dans le cas où l'on souhaite récupérer les cellules, le milieu de culture est éliminé par aspiration. Les cellules sont rincées, puis grattées de leur support et récupérées dans du "phosphate buffer saline". Elles sont ensuite broyées ou lyophilisées, et introduites dans des compositions cosmétiques. Si l'on veut isoler des cellules les substances protectrices synthétisées, on les fait éclater par différentes techniques connues telles que sonication, choc osmotique, potter. La suspension obtenue est alors centrifugée, et, selon le cas, le surnageant et/ou le culot sont récupérés comme principe actif pour être incorporé dans les compositions cosmétiques selon l'invention.

[0039] Dans le cas où on désire récupérer le milieu de culture, on effectue une centrifugation après aspiration du milieu, afin d'éliminer les cellules présentes. Il est ensuite possible de concentrer le surnageant par évaporation de manière à potentialiser les effets des substances présentes.

[0040] Selon l'invention, le support cosmétiquement acceptable de la composition peut contenir, outre le ou les principe(s) actif(s) ci-dessus défini(s), au moins un composé cosmétiquement actif utilisable, de façon connue, comme constituant d'une composition cosmétique. La composition cosmétique peut être sous forme de crème, lait, lotion, ou sérum. Dans le cas où on prépare une crème, on peut introduire de 0̸,1 à 30̸ % en poids de principe(s) actif(s) dans la composition cosmétique. Dans le cas où la composition cosmétique est de type sérum, les quantités de principe(s) actif(s) introduites peuvent être très supérieures, notamment comprises entre 30̸ et 10̸0̸ %.

[0041] On appliquera, en général matin et soir, 1 à 2 mg/cm² en moyenne de composition, cette quantité étant plus faible (0̸,0̸2 mg/cm² environ) dans le cas de sérum ou de lait.

[0042] Les exemples donnés ci-dessous, à titre purement illustratif et non limitatif, permettront de mieux comprendre l'invention.

EXEMPLE 1

[0043] On décrit ci-après un procédé de préparation d'un principe actif contenant des substances protectrices.

1. Mise en culture de kératinocytes

[0044] Dans un premier stade, on cultive des kératinocytes, qui proviennent d'une plastie mammaire d'une femme de 40̸ ans.

[0045] Après avoir été découpé par un électrokératome de 0̸,3 mm, l'épiderme est séparé du derme supérieure par immersion dans une solution de trypsine ayant une concentration de 0̸,20̸ %. L'épiderme et le trypsinisat sont alors récoltés, soumis à une agitation pendant 1 minute, puis à une filtration à travers deux couches de gaze stérile.

[0046] Les kératinocytes sont alors ensemencés dans un milieu Eagle's modifié Dulbecco, contenant en poids 10̸ % de sérum de veau foetal, 1 % d'acides aminés non essentiels, 1 % de pyruvate de Na et des antibiotiques (Pénicilline : 75 U.I./ml, streptomycine : 75 µg/ml et fongizone : 8,7 µg/ml).

2. Irradiation aux U.V.

[0047] Dans un second stade, on soumet les cellules à l'action de rayons ultra-violets. Pour ce faire, après 5 jours, le milieu de culture défini sous 1 ci-dessus est éliminé, le tapis cellulaire est lavé par une solution saline tamponnée, puis les cellules sont irradiées par des UVA à raison de 30̸0̸ mJ/cm². Le milieu de culture est ensuite prélevé tous les jours pendant 5 jours. Il est alors soumis à une centrifugation à 10̸0̸0̸ g pendant 10̸ minutes, de façon à séparer les cellules du milieu de culture.

[0048] Le milieu ou surnageant est concentré par évaporation et on obtient un premier principe actif.

[0049] Les cellules séparées par centrifugation sont rincées, frottées de leur support, puis mises en suspension dans de l'eau distillée de façon à les faire éclater. La solution obtenue après éclatement constitue un second principe actif.

[0050] On mélange à parties égales les deux principes actifs et on utilise le mélange dans les exemples 2 à 9 données ci-après, pour illustrer les compositions selon l'invention.

EXEMPLE 2 - Crème solaire

[0051] La formulation est donnée en % en poids :

[0052] Cette composition protège la peau vis-à-vis des rayonnements U.V. qui l'agressent. Elle contribue à limiter la formation des radicaux libres et leurs conséquences au niveau cutané, et elle atténue l'augmentation du réseau microdépressionnaire.

EXEMPLE 3 - Emulsion huile dans l'eau

[0053] La formulation est donnée en % en poids

[0054] Cette composition, utilisée en particulier chez des personnes dont la peau est à tendance sèche, procure une bonne hydratation du Stratum Cornéum et protège la peau vis-à-vis de variations notables d'humidité. Elle améliore de ce fait l'élasticité cutanée.

EXEMPLE 4 - Crème de soins constituée par une émulsion eau dans l'huile

[0055] La formulation est donnée en % en poids :

EXEMPLE 5 - Crème de soins constituée par une émulsion eau dans l'huile

[0056] La formulation est donnée en % en poids :

[0057] (a) Le principe actif de ces deux émulsions a été obtenu à partir d'une culture de kératinocytes soumise à une agression par la température selon le procédé suivant : les kératinocytes ont été cultivés à 37°C et à confluence le milieu de culture à été remplacé par un milieu contenant de l'acide N′-2-hydroxyéthylpipérazine N-éthane sulfonique ; ils ont été ensuite placés dans un bain-marie thermostaté à 45°C sous agitation pendant 2 heures ; ce milieu a ensuite été remplacé par du milieu Eagle's modifié contenant du sérum de veau foetal, puis laissé au contact des cellules pendant 36 heures.

[0058] Les deux émulsions huile dans l'eau des exemples 4 et 5 protègent la peau contre les phénomènes de sécheresse, notamment en favorisant la cohésion cellulaire altérée lors de variations de température.

EXEMPLE 6 - Crème teintée

[0059] La formulation est donnée en % en poids :

[0060] (b) Le principe actif de cette crème a été obtenu à partir d'une culture de kératinocytes soumise à une agression à l'aide d'un détergent.

[0061] L'application régulière de cette crème permet d'améliorer le teint, qui a tendance à ternir avec l'âge, et ceci d'autant plus que la peau se trouve dans un environnement pollué.

EXEMPLE 7 - Lait corporel

[0062] La formulation est donnée en % en poids :

[0063] (c) Le principe actif de ce lait a été obtenu à partir d'une culture de fibroblastes soumise à une agression par carence en vitamines.

[0064] Le lait, appliqué sur le corps entier, permet de limiter les effets de carence ou sub-carence qui se manifestent au cours du vieillissement.

EXEMPLE 8 - Crème de soins

[0065] On fabrique une dispersion aqueuse de vésicules lipidiques par le procédé décrit dans le brevet français 2 315 991 à partir des substances suivantes :

[0066] Lipide amphiphile non-ionique de formule générale :




On ajoute à la dispersion de vésicules obtenue dans la première phase, les substances suivantes :

[0067] (d) Le principe actif de cette crème a été obtenu à partir d'une culture de fibroblastes soumise à une agression électromagnétique. On a soumis le milieu de culture à un champ magnétique de 15 Gauss ayant une fréquence de 50̸ Hertz, avec un pic d'une durée de 5 millisecondes obtenu à l'aide d'une paire de bobines de Helmotz. La durée d'application est de 3 jours.

[0068] Les propriétés restructurantes de cette crème permettent d'atténuer les marques de vieillissement telles que les rides.

EXEMPLE 9 - Sérum

[0069] La formulation est donnée en % en poids :

[0070] (e) Le principe actif de ce sérum a été obtenu à partir d'une culture de kératinocytes et de fibroblastes, soumise à une agression simultanée par carence en vitamines et aux ultra-violets.

[0071] Cette composition améliore la tonicité cutanée.

[0072] Dans tous ces exemples de formulation, le principe actif utilisé peut être remplacé par un principe actif obtenu à partir d'une culture de cellules soumise à une autre agression.

Revendications

1. Composition cosmétique contenant, dans un support cosmétiquement acceptable, au moins un composé obtenu par culture de cellules animales, caractérisée par le fait que ledit composé est une substance protectrice de la peau ou des cheveux synthétisée par lesdites cellules en réponse à au moins une agression, lorsqu'elles sont cultivées in vitro.

2. Composition selon la revendication 1, caractérisée par le fait que les cellules animales, qui produisent la (ou les) substance(s) protectrice(s), sont des cellules extraites de la peau humaine, de la gaine d'un cheveu humain ou d'un cil.

3. Composition selon la revendication 2, caractérisée par le fait que les cellules de la peau humaine sont des kératinocytes et/ou des fibroblastes.

4. Composition selon l'une des revendications 2 ou 3, caractérisée par le fait que les cellules productrices de substance(s) protectrice(s) sont prélevées chez la personne destinée à utiliser la composition cosmétique.

5. Composition selon la revendication 4, caractérisée par le fait que les cellules prélevées sont congelées et conservées durant plusieurs années avant remise en culture.

6. Composition selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisée par le fait que l'agression est choisie dans le groupe formé par les actions d'un rayonnement ultra-violet, de variations de température, d'un champ électromagnétique, d'un agent chimique et/ou d'une carence en élément normalement présente dans le milieu de culture.

7. Composition selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisée par le fait qu'elle contient des principes actifs obtenus en réponse à plusieurs agressions.

8. Composition selon l'une des revendications 1 à 7, caractérisée par le fait que les cellules utilisées sont mises en culture, de préférence jusqu'à confluence, et subissent ensuite l'agression (ou les agressions) choisie(s).

9. Composition selon la revendication 8, caractérisée par le fait que la culture s'effectue en présence de précurseurs des substances qui seront synthétisées suite à l'agression.

10. Composition selon l'une des revendications 1 à 9, caractérisée par le fait que les substances protectrices sont utilisées, sans séparation ou purification préalable, sous forme d'un principe actif constitué par le milieu de culture et/ou les cellules et/ou une solution obtenue après éclatement des cellules.

11. Composition selon la revendication 10̸, caractérisée par le fait que le milieu de culture et/ou la solution obtenu par éclatement des cellules sont concentrées.

12. Composition selon l'une des revendications 1 à 11, caractérisée par le fait que son support cosmétiquement acceptable contient au moins un composé cosmétiquement actif.

13. Composition selon l'une des revendications 1 à 12, caractérisée par le fait qu'elle est sous forme de crème, lait, lotion ou sérum.

14. Composition selon la revendication 13, présentée sous forme de crème, caractérisée par le fait qu'elle contient de 0̸,1 à 30̸ % en poids de principe(s) actif(s) tel(s) que défini(s) à l'une des revendications 10̸ ou 11.

15. Composition selon la revendication 13, présentée sous forme de sérum, caractérisée par le fait qu'elle contient de 30̸ à 10̸0̸ % en poids de principe(s) actif(s) tel(s) que défini(s) à l'une des revendications 10̸ ou 11.

Ansprüche

1. Kosmetisches Mittel enthaltend in einem kosmetisch verträglichen Träger mindestens eine Verbindung, erhältlich aus einer Kultur tierischer Zellen,
dadurch gekennzeichnet, daß die Verbindung eine Schutzsubstanz der Haut oder der Haare ist, welche durch diese Zellen als Antwort auf mindestens eine Reizung synthetisiert wird, wenn diese invitro kultiviert werden.

2. Mittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die tierischen Zellen, welche die Schutzsubstanz(en) produzieren, Zellen,extrahiert aus der menschlichen Haut, aus der Hülle eines menschlichen Haars oder eines Wimpernhaars sind.

3. Mittel nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die menschlichen Hautzellen Keratinozyten und/oder Fibroblasten sind.

4. Mittel nach einem der Ansprüche 2 oder 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Zellen zur Produktion der Schutzsubstanz(en) von der Person entnommen werden, die zur Verwendung des kosmetischen Mittels bestimmt ist.

5. Mittel nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß die entnommenen Zellen vor ihrer Kultivierung über mehrere Jahre eingefroren und konserviert werden.

6. Mittel nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, daß die Reizung ausgewählt ist unter den Wirkungen einer Ultraviolettstrahlung, von Temperaturschwankungen, eines elektromagnetischen Felds, eines chemischen Agens und/oder eines Mangels an einem normalerweise in dem Kulturmedium vorhandenen Element.

7. Mittel nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß es Wirkstoffe enthält, die als Antwort auf mehrere Reizungen erhältlich sind.

8. Mittel nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß die verwendeten Zellen vorzugsweise bis zur Konfluenz in Kultur gehalten werden und anschliebend der (oder den) ausgewählten Reizung(en) unterzogen werden.

9. Mittel nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß die Kultivierung in Gegenwart von Prekursoren der aufgrund der Reizung synthetisierten Substanzen erfolgt.

10. Mittel nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch gekennzeichnet, daß die Schutzsubstanzen ohne vorhergehende Abtrennung oder Reinigung in Form eines Wirkstoffes verwendet werden, der aus dem Kulturmedium und/oder den Zellen und/oder einer nach Zellaufschluß erhaltenen Lösung besteht.

11. Mittel nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß das Kulturmedium und/oder die durch Zellaufschluß erhaltene Lösung aufkonzentriert sind.

12. Mittel nach einem der Ansprüche 1 bis 11, dadurch gekennzeichnet, daß dessen kosmetisch verträglicher Träger mindestens eine kosmetisch aktive Verbindung enthält.

13. Mittel nach einem der Ansprüche 1 bis 12, dadurch gekennzeichnet, daß es in Form einer Creme, einer Milch, einer Lotion oder eines Serums vorliegt.

14. Mittel nach Anspruch 13, in Form einer Creme, dadurch gekennzeichnet, daß es 0,1 bis 30 Gew.-% des Wirkstoffes (der Wirkstoffe) nach einem der Ansprüche 10 oder 11 enthält.

15. Mittel nach Anspruch 13, in Form eines Serums, dadurch gekennzeichnet, daß es 30 bis 100 Gew.-% des Wirkstoffs (der Wirkstoffe) nach einem der Ansprüche 10 oder 11 enthält.

Claims

1. Cosmetic composition containing, in a cosmetically acceptable vehicle, at least one compound obtained by the culture of animal cells, characterised in that the said compound is a substance protecting the skin or the hair, synthesised by the said cells in response to at least one stress during in vitro culture.

2. Composition according to Claim 1, characterised in that the animal cells which produce the protective substance(s) are cells extracted from human skin, or from the sheath of a human hair or an eyelash.

3. Composition according to Claim 2, characterised in that the cells from human skin are keratinocytes and/or fibroblasts.

4. Composition according to either of Claims 2 and 3, characterised in that the cells producing the protective substance(s) are removed from the person intended to use the cosmetic composition.

5. Composition according to Claim 4, characterised in that the cells removed are frozen and kept for several years before being returned to culture.

6. Composition according to one of Claims 1 to 5, characterised in that the stress is selected from the group formed by the action of ultraviolet rays, of variations in temperature, of an electromagnetic field, of a chemical agent and/or of a deficiency of an element normally present in the culture medium.

7. Composition according to one of Claims 1 to 6, characterised in that it contains active principles obtained in response to several stresses.

8. Composition according to one of Claims 1 to 7, characterised in that the cells used are cultured, preferably to confluence, and are then subjected to the selected stress (or stresses).

9. Composition according to Claim 8, characterised in that the culturing is performed in the presence of precursors of the substances which will be synthesised as a result of the stress.

10. Composition according to one of Claims 1 to 9, characterised in that the protective substances are used, without prior purification or separation, in the form of an active principle consisting of the culture medium and/or the cells and/or a solution obtained after bursting the cells.

11. Composition according to Claim 10, characterised in that the culture medium and/or the solution obtained by bursting the cells are concentrated.

12. Composition according to one of Claims 1 to 11, characterised in that its cosmetically acceptable vehicle contains at least one cosmetically active compound.

13. Composition according to one of Claims 1 to 12, characterised in that it is in the form of a cream, milk, lotion or serum.

14. Composition according to Claim 13, presented in the form of a cream, characterised in that it contains from 0.1 to 30 % by weight of active principle(s) as defined in one of Claims 10 and 11.

15. Composition according to Claim 13, presented in the form of a serum, characterised in that it contains from 30 to 100 % by weight of active principle(s) as defined in one of Claims 10 and 11.