Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung von Extrakten von Pflanzen der Gattung Sideritis und/oder deren Pflanzenteilen zur Vorbeugung und/oder Beinflussung von Störungen, die mit einer veränderten serotoninergen Neurotransmission verbunden sind, wobei es sich bei den Störungen um depressive Störungen, Panikattacken, generalisierte Angststörung, Zwangssyndrom, klimakterische Beschwerden und Eßstörungen wie Bulimie handelt.
Serotonin (5-Hydroxytryptamin, 5-HT) ist ein biogenes Amin, das beim Menschen im Zentralnervensystem (Bulbus olfactorius, Diencephalon, insbesondere Hypophyse und Mesencephalon) und vor allem in den enterochromaffinen Zellen des Magen-Darm-Trakts (zu 90%) synthetisiert wird. Im Blut wird es in den Thrombocyten transportiert.
Es handelt sich um ein Gewebshormon das im Gehirn als Neurotransmitter wirksam ist.
Ausgangspunkt der Serotonin-Biosynthese ist die für den Menschen essentielle Aminosäure L-Tryptophan, die von den Serotonin-produzierenden Zellen aus dem Blut aufgenommen wird.
Ins Gehirn gelangt Tryptophan über ein Transportsystem, das es mit den verzweigtkettigen Aminosäuren (Valin, Leucin und Isoleucin), Phenylalanin und Tyrosin teilt.
Durch Hydroxylierung am Indolring durch eine mischfunktionelle Oxygenase wird zuerst 5-Hydroxytryptophan gebildet. Dann wird 5-Hydroxytryptophan in einer Pyridoxalphosphat-abhängigen Reaktion zu 5-Hydroxytryptamin decarboxyliert.
Im Gehim wird 5-Hydroxytryptamin im Perikaryon der Nervenzelle synthetisiert und über das Axoplasma den Nervenendigungen zugeführt. Eine Speicherung erfolgt in Vesikeln, aus denen das biogene Amin bei Stimulierung in den synaptischen Spalt exocytotisch freigesetzt wird.
Für die normale Reizweiterleitung durch einen Neurotransmitter ist es erforderlich, dass dieser sehr schnell wieder beseitigt wird, damit der Rezeptor für eine neuerliche Aktivierung regeneriert werden kann. Neben der Inaktivierung durch abbauende Enzyme, im Fall von Serotonin zum Beispiel Monoaminoxidase A, ist die Wiederaufnahme in die Nervenzelle die wichtigste Form der Neurotransmitter-Inaktivierung im Zentralnervensystem.
Das freigesetzte Serotonin wird daher zum Teil aus dem synaptischen Spalt durch ein spezifisches Transportprotein in der Zellmembran wieder in die serotoninerge Nervenendigung aufgenommen.
Serotonin übt seine Wirkung durch Bindung an verschiedene Zellmembranrezeptoren aus, die pharmakologisch in mindestens vier Gruppen (5-HT1, 5-HT2, 5-HT3, 5-HT4) mit zusätzlichen Subtypen untergliedert sind und an Neuronen, Gliazellen, glatter Muskulatur, Endothel- und Epithelzellen und Thrombocyten nachweisbar sind.
5-HT1, 5-HT2 und 5-HT4-Rezeptoren übermitteln extracelluläre Signale über G-Proteine (G-Protein-gekoppelte Rezeptor-Grossfamilie) und vermitteln langsam eine modulierende Zellantwort über eine Beeinflussung der Adenylatcyclase (Hemmung oder Stimulierung) oder Stimulierung der Phospholipase C.
Dagegen ist der 5-HT3-Rezeptor ein Liganden-regulierter lonenkanal, der eine schnelle Depolarisation im Neuron verursacht.
Durch die verschiedenen Rezeptoren werden unterschiedliche biologische Effekte vermittelt:
5-HT1-Rezeptoren verursachen eine Relaxation der glatten Muskulatur in Gefässen und im Gastrointestinal-Trakt und eine selektive Kontraktion kranialer Blutgefässe,
5-HT2-Rezeptoren bedingen eine Kontraktion der glatten Muskulatur und Plättchenaggregation,
5-HT3-Rezeptoren sind an der Entstehung von Übelkeit, Erbrechen, Schmerzen und Angst beteiligt.
Als ursächlicher Vorgang einer Depression wird heute eine Verminderung der noradrenergen oder serotoninergen Neurotransmission, oder beider, im ZNS vermutet (Monoaminmangel-Hypothese der Depression). Der depressiven Erkrankung liegt ein Monoaminmangel zugrunde, der zu einer gesteigerten Empfindlichkeit prä- und postsynaptischer Rezeptoren für die Monoamine Noradrenalin und Serotonin führen soll.
Neben den Monoaminoxidase-Inhibitoren werden heute hauptsächlich tricyclische Antidepressiva und ihre Verwandten einschliesslich der selektiven Serotonin-Wiederaufnahme-Inhibitoren (SSRI) zur medikamentösen Behandlung von Depressionen eingesetzt.
Tricyclische Antidepressiva und ihre Verwandten hemmen die Monoamin-Aufnahme aus dem synaptischen Spalt meistens relativ unselektiv. SSRI hemmen dagegen selektiv die Rückaufnahme von Serotonin.
Durch die Hemmung der Serotonin-Transporter (Hemmung der Wiederaufnahme) wird die Konzentration des entsprechenden Neurotransmitters im synaptischen Spalt erhöht.
Durch die längerfristige Gabe von solchen Antidepressiva kann daher nach entsprechenden Adaptationsprozessen (z.B. "downregulation" von verschiedenen prä- oder postsynaptischen Rezeptoren) die noradrenerge und serotoninerge Neurotransmission im ZNS wieder normalisiert werden.
Als SSRI sind sowohl chemisch-synthetische Wirkstoffe (z.B.: Fluvoxamin, Fluoxetin und Paroxetin) als auch Pflanzenzubereitungen (z.B.: Johanniskraut-Extrakt) in Gebrauch.
Aufgrund ihres für Serotonin selektiven Wirkmechanismus und der über Serotonin-Rezeptoren vermittelten Wirkungen werden SSRI heute aber auch erfolgreich bei chronischen Schmerzen, Panikattacken, generalisierter Angststörung, Zwangssyndrom, klimakterischen Beschwerden und Eßstörungen wie Bulimie eingesetzt.
Pflanzen der Gattung Sideritis, die zur Familie der Lippenblütler (Labiaceae) gehören und von denen bisher etwa 150 verschiedene Arten bekannt sind, finden im Mittelmeerraum traditionell in der Volksmedizin bei entzündlichen Erkrankungen Anwendung. So hat bereits der griechische Arzt Dioskurides im 1. Jahrhundert nach Christus in seiner Arzneimittellehre beschrieben, dass Sideritis-Pflanzen als Umschlag angewandt "die Kraft haben, Wunden zu verkleben und Entzündungen abzuhalten".
Neuere Arbeiten aus den letzten Jahren konnten nachweisen, dass verschiedene Sideritis-Arten antibakterielle, antioxidative, analgetische und entzündungshemmende Wirkung haben.
Als Inhaltsstoffe wurden bisher Mono-, Di-, und Triterpene, Flavonoide und andere Stoffe (z.B.: Coffeinsäure) gefunden.
In der Druckschrift "
Überraschend wurde nun gefunden, dass ein Extrakt aus getrockneten Pflanzen der Gattung Sideritis in Serotonin-Wiederaufnahme-Versuchen mit Synaptosomen aus Ratten-Cortex starke hemmende Eigenschaften zeigte.
Die Erfindung betrifft daher die Verwendung von Extrakten von Pflanzen der Gattung Sideritis und/oder von Teilen der Pflanzen zur Herstellung eines Arzneimittels zur Vorbeugung und/oder Beeinflussung von Störungen, die mit einer veränderten serotoninergen Neurotransmission verbunden sind gemäß Anspruch 1.
Die Erfindung betrifft somit die Verwendung von Extrakten von Pflanzen der Gattung Sideritis und/oder von Teilen der Pflanzen zur Herstellung eines Arzneimittels zur Vorbeugung und/oder Beeinflussung von depressiven Störungen, Panik-Attacken, generalisierten Angststörungen, Zwangssyndrom, klimakterischen Beschwerden und Essstörungen wie Bulimie.
Die Erfindung wird nachfolgend anhand bevorzugter Ausführungsformen und einzelner Beispiele, die ebenfalls bevorzugte Ausführungsformen betreffen, erläutert, ohne auf diese beschränkt zu sein.
In bevorzugten Verwendungen gemäß der Erfindung kommen Extrakte von Pflanzen von Sideritis zur Anwendung. Alternativ dazu ist es auch möglich, Pflanzenteile und Extrakte von Sideritis zusammen zu verwenden.
Wenn Extrakte von Sideritis verwendet werden, sind dies beispielsweise ethanolisch-wäßrige Extrakte, wobei das Volumenverhältnis der Ethanol-Wasser-Mischung für die Gewinnung der Extrakte aus Sideritis in weiten Grenzen schwanken kann. Es liegt besonders bevorzugt bei 99 : 1 bis 1 : 99 Vol.-%, noch weiter bevorzugt bei 65 : 35 bis 35 : 65 Vol.-%, am meisten bevorzugt bei 55 : 45 bis 45 : 55 Vol.-% (bezogen auf das Verhältnis Ethanol : Wasser in der gesamten, zur Extraktion verwendeten Mischung).
Als Extraktionsmittel können jedoch auch andere Mischungen, beispielsweise Mischungen von Wasser mit organischen Lösungsmitteln, oder auch reine Lösungsmittel verwendet werden. Infrage kommen Wasser, Dimethylsulfoxid (DMSO), Mischungen von Kohlenwasserstoffen wie beispielsweise die unter dem Begriff "Petrolether" bekannten niedrig siedenden Benzin-Fraktionen (überwiegend Pentane und Hexane als Komponenten), halogenierte Kohlenwasserstoffe, insbesondere chlorierte Kohlenwasserstoffe, beispielsweise Mischungen aus Methylenchlorid und Chloroform sowie Ester niederer (C1- bis C4-) Alkohole mit niederen (C1- bis C4-) Carbonsäuren, beispielsweise Essigester (Essigsäureethylester).
Extraktionsmittel kann auch CO2 sein. Eine CO2-Extraktion kann beispielsweise (jedoch nicht ausschließlich) bei überkritischen Bedingungen erfolgen, was den Vorteil hat, für die zu extrahierenden Pflanzen der Gattung Sideritis besonders schonend zu sein.
In weiter bevorzugten Ausführungsformen der Erfindung werden die mittels der vorstehend beispielhaft genannten Extraktionsmittel hergestellten Extrakte nicht als solche verwendet, sondem in Form von Fraktionen, die aus den genannten Extrakten gewonnen wurden. Dies kann auf beliebigen, dem Fachmann als solches bekannten Wegen geschehen und bedarf daher an dieser Stelle keiner weiteren näheren Erläuterung.
Weiter können in anderen bevorzugten Ausführungsformen gemäß der Erfindung die Extrakte von Pflanzen der Gattung Sideritis und/oder deren Teilen und/oder aus solchen Extrakten hergestellte Fraktionen einzeln oder in Kombination miteinander in Kombination mit anderen Pflanzen in Form von Pflanzenteilen und/oder in Form von Extrakten solcher anderer Pflanzen verwendet werden. Genauso ist auch erfindungsgemäß bevorzugt, die Extrakte von Pflanzen der Gattung Sideritis und/oder deren Teilen und/oder aus solchen Extrakten hergestellte Fraktionen einzeln oder in Kombination miteinander in Kombination mit chemisch-synthetischen Stoffen zu verwenden; auch im letztgenannten Fall können in einer bevorzugten Ausführungsform andere Pflanzen in Form von Pflanzenteilen und/oder Extrakten solcher anderer Pflanzen verwendet werden.
Die erfindungsgemäße Verwendung gemäß den vorstehend beschriebenen Ausführungsformen kann eine Verwendung in Form einer pharmazeutischen Zubereitung sein. Als solche kann sie allgemein übliche und dem Fachmann als solche bekannte Darreichungsformen annehmen, die eine bestimmte Konzentration an Sideritis-Komponenten in einer Form enthalten, die einer Verabreichung mit einem bestimmten Plan (einmal täglich eine Dosis-Einheit oder dreimal täglich eine Dosis-Einheit, um nur zwei Beispiele zu nennen) folgt. Die Darreichungsform richtet sich in dem Fachmann bekannter Weise nach dem Verabreichungsweg (oral, intravenös, intramuskulär, nasal) und kann eine feste, halbfeste, flüssige, nebelartige, gasförmige oder andere die Verabreichung auf dem gewünschten Weg erlaubende Form sein.
In einer anderen Ausführungsform kann die Verwendung eine Verwendung in Form eines Nahrungsergänzungsmittels sein. Als solche kann sie ebenfalls allgemein übliche, dem Fachmann als solche bekannte Aufnahmeformen annehmen, die üblicherweise oral aufnehmbare Formen sind. Beispiele hierfür sind meist feste, gegebenenfalls in flüssige Form bringbare (beispielsweise lösbare oder suspendierbare oder dispergierbare) feste oder flüssige Aufnahmeformen. Diese können bei der erfindungsgemäßen Verwendung allein aufgenommen werden oder zusammen mit anderen Nahrungsmitteln aufgenommen werden.
Die folgenden Beispiele einer bevorzugten Ausführungsform erläutern die Erfindung, ohne sie zu beschränken.
Männliche Wistar-Ratten (250-300 g) wurden einzeln in einem klimatisierten Raum (21 +/- 2 °C) mit 12 h hell/dunkel-Zyklus gehalten. Die Tiere erhielten Futter und Wasser ad libitum.
Die Tiere wurden dekapitiert, und das Gehirn wurde schnell entnommen. Der Cortex wurde auf Eis herauspräpariert. Das Cortex-Gewebe wurde in 10 Volumenteilen eiskalter 0,32 M Saccharoselösung (mit 2,5 mM HEPES, pH 7,4) mit einem Potter-Elvehjem-Glas/Teflon-Homogenisator unter Eiskühlung homogenisiert, und das entstandene Homogenat wurde 10 min bei 900*g und 4 °C zentrifugiert.
Der Überstand wurde entnommen, in Eppendorf-Hütchen überführt und 10 min bei 11.000*g (4 °C) zentrifugiert. Die so präparierten Synaptosomen wurden bis zur weiteren Verwendung auf Eis gelagert.
Das verwendete Puffersystem war Farnebopuffer (121 mM NaCl, 1,8 mM KCl, 1,3 mM CaCl2, 1,2 mM MgSO4, 25 mM NaHCO3, 1,2 mM KH2PO4, 11 mM Glucose, 0,57 mM Ascorbinsäure, gesättigt mit 95% O2/5% CO2, pH 7,4) mit 50 µM Pargylin (als MAO-Hemmer).
Sideritis wurde zerkleinert und in DMSO extrahiert. 10 µl dieser Lösung wurden zusammen mit 180 µl Puffer in eine Vertiefung einer 96-well Filterplatte (Millipore MultiScreenFB) gegeben. Die Endkonzentration an Sideritis war 500 µg/ml.
Für Vergleichsexperimente wurden Johanniskraut (500 µg/ml) und der selektive Serotonin-Wiederaufnahmehemmer Fluvoxamin (10 µM) eingesetzt.
Die auf Eis gelagerten Synaptosomen wurden in Farnebopuffer resuspendiert und jeweils 50 µl jedem Ansatz zugegeben. Der Ansatz wurde bei Raumtemperatur 10 min geschüttelt.
Anschließend wurden schnell 10 µl [3H]-Serotoninlösung zugegeben und der Ansatz 20 min bei 37 °C unter Schütteln inkubiert.
Die Reaktion wurde durch Absaugen und mehrfaches Spülen mit Farnebopuffer beendet. Die Radioaktivität im Filter wurde nach Herausstanzen aus der Platte durch Szintillationsmessungen bestimmt.
Die Auswertung der Versuche führte zu folgenden Wiederaufnahme-Raten (vgl. auch Figur 1):
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